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e****p
发帖数: 354 | 2 做Northern blot， 看到清楚的目的条带，
但18S 28S位置上的有很强信号，查了PROBE并无太大同源性，PROBE 1400BP大小，用的
20ugTOTAL RNA
重复做了还是这样，有没有遇到这样的情况。有什么好办法?
多谢各位大虾 。。 |
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c******y
发帖数: 148 | 3 我也出现过这种情况
别人这么给我解释的，
如果你是用PCR产物做的探针,PCR的模板来自基因组的话，可能就会把一些28s 18s 基
因片段非特异扩增下来，然后被标记，而28 18RNA的量很大，所有会有信号
解决办法:
1， 使用来自质粒酶切的片段标探针
2，PCR纯化探针后，稀释1000做模板，换另一对内部引物继续PCR，纯化
3，合成oligo片段 |
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w***z
发帖数: 1158 | 4 也碰到过这个问题。
用质粒做模板标记探针，针对同一基因做了2条探针，其中一条探针blot后只有特异条
带，但另一条除了特异条带外，18 28S也都有。总RNA和mRNA都试过，结果相似。 |
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J**a
发帖数: 215 | 5 谢谢了！我做了TapeStation RNA Tape, 所以看的不是一个target mRNA transcript，
而是所有的total RNA profile。IP前后的RNA在TapeStation跑出来都是rRNA占绝大多
数，18S和28S的2个peak都很高。不知道TapeStation对mRNA的sensitivity怎么样，但
是我assume 18S，28S两个峰底下那些background就是mRNA，看上去这些mRNA并没有明
显的相对于18S,28S的峰有enrich。。。不知道这个正常么？ |
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J**a
发帖数: 215 | 6 多谢！请问一般用什么方法比较reliable的测出rRNA/mRNA ratio? 我做了TapeStation
RNA Tape, IP前后的RNA在TapeStation跑出来的trace都是rRNA占绝大多数，18S和28S
的2个peak IP前后都很高。不知道TapeStation对mRNA的sensitivity怎么样，但是我
assume 18S，28S两个峰底下那些看似background的就是mRNA，但是看上去这些mRNA并
没有明显的相对于18S,28S的峰有enrich。。。不知道这个正常么？ |
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l*********k
发帖数: 133 | 7 最近买GNC的大补丸送了一些free sample，俺对其中的鸡血类补剂一向敬而远之，今天
作了回小白鼠，试用了1 M.R. pre-workout powder。
成份中除了常见的Nitric Oxide外专门注明有三杯咖啡含量的咖啡因，根据说明锻炼前
20分钟冲水喝了一杯，不久就感觉心跳明显加快，到Gym先stretch然后热身大概5分钟
后心跳已经很快，而且有点恍惚的感觉，和能提高focus的说明相去甚远。。。然后开
始正常的full-body routine
dumbbell BP
75x14热身，感觉并不比平时更轻松，不过反正是热身，平时也很轻松
100x7，感觉比较怪，平时也是100x7，今天不觉得很强大，但是做完最后一个觉得可能
还可以多做，anyway，心跳太快，不push自己
95x8，比平时多一个
90x7
85x8
80x10
（总之就是心跳快，不觉得有明显的boost效果，不过每组做完都不疲劳，除了喝水基
本不休息直接做下一组，大概45秒间隔？明显比平时恢复快）
Cable下斜
x14
x14
x12
x12
（重量和数量都没有变化，组间休息时间大大缩短）
负重... 阅读全帖 |
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y***r
发帖数: 1845 | 8 在版上潜水快两个月了，向各位美女、老师学习到不少知识，调整了一下饮食，现在想
跟上潮流也开始健身减肥。在这里记录一下鞭策自己吧。
身高178cm，多年没有变化了。体重从大学时候大概130斤到前几年到美国145磅左右，
再涨到160，高峰时期可能接近165，前段时间差不多160-162磅。
最近走路上班，单程约1.33miles，大约4-5miles/hour的速度。周末带LP娃走trail，
平时有空做俯卧撑什么的。准备有空再单独跑步。现在要做饭，帮忙带娃，工作很忙，
还没抽出固定时间（每天1小时）运动。
经过一个多月的调整，最近大概降到153-154磅。大家测体重都什么时间？我是等晚上
洗漱完毕一家人轮流过秤。早上秤要轻一些，从trail回来更轻，波动范围从不到153至
155多。
后来的基本策略是健康饮食，逐渐增加锻炼，争取恢复到145-148左右。减去肥肉之后
增加肌肉，以后希望到150-155之间。
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9/6: 携若干杂物2.8 miles 33:12s
9/7: 携若干杂物3.54 miles, 42:35s
9/8: 没有出去
9/9： 带LP和两个小孩走5.01m... 阅读全帖 |
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g******1
发帖数: 244 | 9 更新：跑了个琼脂糖电泳，28S 和18S条带很清楚，有少量Smear。但是5S最亮，18S 看
起来比28S亮一点。这是不是跟降解有关？ |
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a******8
发帖数: 56 | 10 RNA quality is low.
1. you have signal in the well, likely from protein.
2. besides 28s/18s RNA bands, you have higher mol weigh stuff in the gel
3. 28s/18s ratio should be above 2, while yours is almost equal, which
indicates substantial degradation
Get better RNA first. At least no protein should remain in your yield.
This will affect your RT reaction. |
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k*****n
发帖数: 417 | 11 试了两个同位素标记的DNA短探针 都只有50 base左右 杂交温度42度 但结果是一个检
测到28S 一个检测到28S和18S 都没有看到目的基因 请问这是怎么回事？可以通过提高
杂交温度减少非特异结合吗？
非常感谢~~ |
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H**F
发帖数: 177 | 12 从下面开始看， 日本地震， 9日开始小震，11日高潮，到现在还在不停的震，再抖啊
抖的日本会不
会沉？
Link: http://neic.usgs.gov/neis/qed/
2011/03/17 23:11:40 38.99N 142.60E 45 4.8 NEAR THE EAST
COAST OF HONSHU, JAPAN
2011/03/17 23:01:26 36.47N 143.95E 39 4.8 OFF THE EAST
COAST OF HONSHU, JAPAN
2011/03/17 21:24:24 39.09N 142.27E 59 4.8 NEAR THE EAST
COAST OF HONSHU, JAPAN
2011/03/17 21:18:25 37.84N 139.89E 57 4.7 EASTERN HONSHU,
JAPAN
2011/03/17 21:06:31 35.69N 141.28E 41... 阅读全帖 |
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c**i
发帖数: 6973 | 13 Voice of Russia, Oct 6, 2011.
http://english.ruvr.ru/2011/10/06/58279723.html
Note: FD-2000 has no Chinese name. It is 红旗9远程地空导弹的 出口型号.
(2) Lee Ferran, China Still Spies the Old Fashioned Way, Russia Says. ABC
News, Oct 6, 2011
http://abcnews.go.com/Blotter
/china-espionage-spotlight/story?id=14674961
("While the accusations out of the US primarily refer to cyber intrusions of
American corporations, the Russian government is accusing China of an old
standby in the tradecraft playbook: outright ... 阅读全帖 |
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s*****r
发帖数: 43070 | 14 【 以下文字转载自 SanFrancisco 讨论区 】
发信人: iMaJia (iMac,iPod,iPad,i馬甲), 信区: SanFrancisco
标 题: 锁男们流口水吧! 流口水吧! 流口水吧! (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 9 16:45:10 2016, 美东)
发信人: iMaJia (iMac,iPod,iPad,i馬甲), 信区: Joke
标 题: 锁男们流口水吧! 流口水吧! 流口水吧!
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 9 14:52:36 2016, 美东)
大白牛, 大白猪, 大亮房. 特别是住湾区百万美元小黑屋的房奴们!
http://www.youtube.com/watch?v=tFyIxaRDBAs&t=28s |
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g*******8
发帖数: 3 | 18 长岛好区出租；一房一厅一厨一卫，独立出入，包水电网，带简单家具，新装修厨房，
交通便利，近长岛火车站，开车7分钟到NCC，15分钟到海边，Southern State PKW 28S
, 495 41s, 南边
有兴趣的直接联系：1-617-816-1957
微信：35031158 |
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g*******8
发帖数: 3 | 19 长岛好区出租；一房一厅一厨一卫，独立出入，包水电网，带简单家具，新装修厨房，
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g*******8
发帖数: 3 | 20 长岛好区出租；一房一厅一厨一卫，独立出入，包水电网，带简单家具，新装修厨房，
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a*****a
发帖数: 19262 | 22 刚去游泳队网站去查了一下，请留情，别笑话哦。我知道这个水平跟8岁组的成绩是相
差很大，也希望她在一年之内会有很大提高，都能在二十几秒之内。
F # 22A Girls 6 & Under 25 Breast 42.65S
F # 32A Girls 6 & Under 25 Fly 38.28S
# 2A Girls 6 & Under 25 Free X 35.53S
# 12A Girls 6 & Under 25 Back X 35.83S |
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f**d
发帖数: 24 | 24 here is some information of rebate cent. Hope it is useful.
Parago / RebatesHQ
Coppell, TX & McAllen, TX
www.rebateshq.com (Rebate Lookup)
www.rebateshq.com/parago/contact_us.htm (Rebate Center contact numbers by
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www.rebateshq.com/clients/parago/rebates/email_us.jsp (Email webpage)
866-450-9695
888-221-4692
TCArebates / WheresMyRebate.com
New Rochelle, NY
www.wheresmyrebate.com
http://www.wheresmyrebate.com/results.asp?postalcode=00000&SearchSubmit=Find+R
ebate%28s%29 (Zipcode only searc |
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t*****l
发帖数: 805 | 25 Online Rebate Tracking Program
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Parago / RebatesHQ
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W*********n
发帖数: 775 | 29 我是中科院海洋所的一名海洋生物学博士，6月份毕业；希望到美国作博后。我博士期
间做扇贝（软体动物）的分子免疫相关研究，主要是克隆了2个蛋白酶抑制剂基因，运
用real time RT-pcr 对其在菌刺激后的表达规律进行研究，验证其参与了免疫应答；
然后在原核细胞中对基因进行表达，对重组蛋白进行抑制蛋白酶的活性研究，并对其抑
制常数进行实验与计算。想继续做点pull-down，及RNAi对其相互作用的蛋白及其体内
功能进行研究，但是时间好像比较紧张。
硕士期间做赤潮生物原甲藻属的分子系统生物学研究（18S，28S，ITS区），并对物种
特异性探针的设计进行研究，以期用于海上实时检测。
查阅美国，做海洋生物的分子生物的好像不多，目前只查到Dr Warr。
感觉转医学健康相关应该一点戏都没有的；但是"免疫-流行病"，或“兽医”是否几率
大些？ 果蝇，线虫，或斑马鱼的可能性呢？
我想让大家看看我这个背景（自我感觉比较差，不过海洋生物起步比较晚，就这现状）
申请美国哪个方向的比较可行？那些专业，或者那些学校？当然指点一些实验室最好。
谢谢先！（个人原因，首选密歇根州及其周边城市） |
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P******u
发帖数: 2 | 30 本文引用自 红杏《喜欢吃鱼的朋友一定要转哦》
1、【口水鱼的做法】
2、【水煮鱼的做法】
3、【煎鱼的做法】
4、【海蒸鱼的做法】
5、【雪鱼的做法】
6、【糖醋鱼的做法】
7、【红烧鱼的做法】
8、【酸菜鱼的做法】
9、【花椒鱼片的做法】
10、【葱油鱼的做法】
11、【【糖醋脆皮鱼的做法】
12、【剁椒鱼头的做法】
13、【柴把鱼的做法】
14、【松鼠桂鱼的做法】
15、【啤酒鱼的做法】
16、【鸳鸯鱼枣的做法】
1、【口水鱼的做法】
原料: 花鲢鱼一条，淀粉两大匙，油炸花生仁约半两，熟白芝麻两大匙，老姜一小块，
蒜一个，香葱五棵，豆豉两匙，料酒三大匙，酱油两大匙，醋一大匙，白糖一匙，红油
辣椒一两，花椒油两大匙，盐、味精适量，香油一大匙。
1、鱼洗净片成片，用盐、料酒拌匀腌几分钟，再加水淀粉拌匀码味，油炸花生仁剁成
碎粒，豆豉剁碎，葱、蒜、姜切末。
2、锅中放油烧至六成热，倒入豆豉、姜末、蒜末炒出香味。
3、在大钵中放入盐、味精、白糖、酱油、醋、炒过的姜蒜豆豉、红油辣椒、花椒油、
香油、油炸花生仁搅拌均匀兑成调味汁。
4、锅置旺火上放油烧至四成热，放入鱼片滑散炒熟。
5、捞出沥干... 阅读全帖 |
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b*******e
发帖数: 6920 | 32 不知道你家住哪儿
如果去DOWNTOWN的话，从机场有一个上1A的出口，然后走16W，转28S，或者16W换95S都行 |
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d**********t
发帖数: 20415 | 36 还好了，LBJ那28s还是丢进了一个三分的，那场比赛我从头看到尾，裁判算正常吧，第
三节吹热火挺多的，第四届忘会找了一点，要说裁判最大的问题，就是阿伦投进三分后
的强行review,让parker失去了一次快攻的机会 |
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t******o
发帖数: 6493 | 37 我跟一个马刺的球迷哥们儿一起看的。看到第三节，郁闷啊，后来LBJ带队反超了，爽
。然后parker又反超了，28s了，感觉没戏了。差点想骂人，后来想算了算了，老詹真
命苦啊。然后３分来了，我从沙发上跳起来了。加时赛到最后，那哥们儿不看了，直接
回家了 |
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j*******n
发帖数: 10868 | 38 这一套不是专门练肩的routine，而是练完肩后的附加练习，关键是一组4个动作28个
repeats一气呵成，每组之间休息45秒，小重量(17.5磅) |
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e*******e
发帖数: 9616 | 44 25 yards
For guy, 7-8
For girl, 8-9
50M for phelps, 18 strokes, timing should be #of strokes + 10. In his
case, 28s for 50M.
It took Ian Crocker 4 strokes to get to the wall no matter what lap he
is in, but it took NCAA final girls 9-10 strokes to get to the wall
after the first lap.
It also depend on how many underwater dolphin kicks you do before you
break out, the more you kick, the less stroke you would take. Sometimes
it takes me same number of strokes as Ian Crocker to get to the wall
for |
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R*****s
发帖数: 41236 | 45 【 以下文字转载自 Tri 讨论区 】
发信人: Rodimus (变叔- unstoppable), 信区: Tri
标 题: 做了个游泳测试
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jun 8 21:01:08 2012, 美东)
6/8/12
先游了250yd x 2, best time: 5:04, 又PR了.....
要是早上不做那100个深蹲， 今天估计就能破5分了...
还是第一次游得最快最轻松， 感觉还是胳膊的
有氧能力不行的原因....
然后试了试新买的kick board和pull buoy,
分别测试了一下只打水/只滑水/正常游， 25yard,
每种都大约测了4-6次， 取最好时间(都是带踢墙），
结果：
带pull buoy划水： 29s
扶kick board打水：28s
正常游：25s
发现带pull buoy很怪， 还不如自己打水， 也不如正常游快....
扶kick board腿打水相当的累， 打一趟喘半天， 效率还是比手
差太多了， good news是倒不算太慢...
正常游和带pull buoy游基本划水次数差不多， 25yard基本两个手... 阅读全帖 |
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d**y
发帖数: 18174 | 46 对比一下两段视频的打水，不知道是什么原因，第二段明显好于第一段。比如35s vs
28s。
也许你降低频率的时候故意打水也减了力量？频率可以下降，但是打水都要做到位。你
第一段有几次打水，上打的时候腿没有伸直，膝盖没有上抬的动作。有一个画面显示右
腿小腿下打的时候，大腿居然还有一个猛地下拉一点的动作；而这个时候，大腿背后肌
肉应该绷紧，固定住膝盖，在小腿下打行将结束的时候拉动膝盖上抬，把腿放直。你的
屁股位置挺好，多练一下打水，应该能改善不少。
还有就是侧打水的效率。你向右换气的时候比较明显，左腿打水几乎没有什么驱动力量
。解决的办法是：向右换气的瞬间，左腿不要打水。迅速吸气之后，头可以转回水里了
，这个时候左腿可以打水一次（对于6次打水）。这样6次打水不是均匀分布的。还有一
个解决办法，就是转肩换气但是尽量少转髋。如果你髋部的柔韧性好，就可以用这个办
法降低手脚的配合难度。 |
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d**y
发帖数: 18174 | 47 有道理，昨天点你提供的链接就看到了这段话。我tutor的小孩年底满11岁，定的新目
标是今年年底30s/50Y，明年六月之前争取达到28s/50Y。得先看看提高SR的效果再说。
have
. |
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r**********n
发帖数: 352 | 48 3/11/2014 (Tuesday, 9th class)
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After warm-up, we did a few 25y fast kick on min; mine were around 26-28s.
Then we did 4 set of 50s, 75s, 100s with a mix of fr/non-fr; DPS/sprint on
pace;
more kicking and pull before cool down
Today went better than last time. I tried to roll my body more but it did
make me tired. J said I am not turning my arms fast enough.
I think my main issue is that I don't have much upper body strength.
Total Yards: 1700 |
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s****y
发帖数: 196 | 49 我最快 25 yards in 28s,连续100 yards 巡航打水要3分钟。我这算打水就走吗？ |
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s****y
发帖数: 196 | 50 我最快 25 yards in 28s,连续100 yards 巡航打水要3分钟。我这算打水就走吗？ |
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